包蟲IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：包蟲IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規(guī)格】 
48人份／盒，96人份／盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒用于體外定性檢測(cè)人血清樣品中的包蟲IgG抗體。
本品系用包蟲抗原包被的微孔板和酶標(biāo)記抗人IgG單克隆抗體及其他試劑制成，用于包蟲病的臨床輔助診斷。
包蟲病是棘球蚴病（Echinococosis）的俗稱，是由棘球絳蟲的幼蟲寄生于人體引起的一種人獸共患寄生蟲病。引起包蟲病的病原主要有：細(xì)粒棘球絳蟲的幼蟲引起囊型包蟲病；多房棘球絳蟲的幼蟲引起泡型包蟲病。家犬和狼、豺、狐等食肉動(dòng)物是棘球蚴絳蟲的傳染源，但家犬是主要傳染源。作為終宿主的家犬排出成熟節(jié)片及大量蟲卵時(shí)，污染草地、水源、家居環(huán)境，食草動(dòng)物和人均因食入蟲卵而被感染。包蟲病患者早期可無任何臨床癥狀，多在體檢中被發(fā)現(xiàn)。主要的臨床表現(xiàn)為棘球蚴囊占位所致壓迫、刺激、或破裂引起的一系列癥狀。包蟲病可發(fā)生在全身多個(gè)臟器，以肝、肺多見，泡型包蟲病對(duì)臟器的危害大于囊型包蟲病，因其可通過外生性增殖向周圍組織浸潤(rùn)、擴(kuò)散，也可通過淋巴或血液擴(kuò)散到其它臟器，猶如惡性腫瘤，就診病人多屬晚期。
包蟲病患者的血清中含有特異性包蟲IgG抗體或循環(huán)抗原或免疫復(fù)合物，檢測(cè)人血清樣品中的包蟲IgG抗體，可用于包蟲病的輔助診斷。
【檢驗(yàn)原理】
酶聯(lián)免疫間接法原理：用包蟲抗原包被微孔板，加待檢者血清到板孔中，包蟲IgG抗體特異性地與微孔板表面的包蟲抗原結(jié)合，形成抗原抗體免疫復(fù)合物。洗板，除去多余物質(zhì)后，加入抗人IgG抗體酶標(biāo)記物，形成（抗原－抗體－二抗酶標(biāo)記物）免疫復(fù)合物。洗板，除去多余的結(jié)合物，加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應(yīng)，通過酶標(biāo)儀測(cè)定顯色反應(yīng)的強(qiáng)弱即可定性檢測(cè)待檢樣品中的包蟲IgG抗體。
【主要組成成分】
1. 本試劑盒包含的組份
序號(hào) 組份名稱 主要成分 使用方法 裝量
    96人份／盒 48人份／盒
1 預(yù)包被包蟲抗原的微孔板 微孔板中預(yù)包被包蟲天然抗原。 可拆成單孔，直接使用 96孔 48孔
2 抗人IgG抗體酶標(biāo)記物 辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗人IgG單克隆抗體（來源于小鼠）；硼酸鹽緩沖液，含防腐劑、穩(wěn)定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 包蟲IgG抗體陽(yáng)性對(duì)照 包蟲IgG陽(yáng)性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩(wěn)定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 包蟲IgG抗體陰性對(duì)照 包蟲IgG陰性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩(wěn)定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 包蟲IgG抗體臨界對(duì)照 包蟲IgG陽(yáng)性人血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、穩(wěn)定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 顯色液A 檸檬酸、過氧化氫。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 顯色液B 檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 濃縮洗滌液 磷酸鹽緩沖液，含0.5%Tween-20，10倍濃縮。 用蒸餾水或去離子水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 樣品稀釋液（IgG） 硼酸鹽緩沖液，甘油。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 終止液 0.5 mol/L H2SO4溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋   1個(gè) 1個(gè)
12 封板膜   4片 4片
13 記錄紙   1份 1份
注：酶標(biāo)記物、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、臨界對(duì)照，必須使用試劑盒配備的，不能使用其它批號(hào)產(chǎn)品。顯色液A、顯色液B、終止液、濃縮洗滌液為通用試劑，可用于本公司所有ELISA試劑盒。
2. 需要但未提供的材料：
微孔板清洗器
(5～40)μL、(40～200)μL、200μL～1mL移液器
37℃恒溫設(shè)備
微孔振蕩器
【儲(chǔ)存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。生產(chǎn)日期及失效日期見標(biāo)簽。
拆封后未用完的微孔板應(yīng)放入密封袋內(nèi)2℃～8℃保存。各組份拆封后應(yīng)在一個(gè)月內(nèi)用完。
【適用儀器】
具有450nm、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀
【樣品要求】
應(yīng)按照臨床采血技術(shù)規(guī)范操作采集血清。室溫保存樣品不要超過8小時(shí)；若實(shí)驗(yàn)在8小時(shí)以后進(jìn)行，需將樣品保存在2℃～8℃；如保存超過1周則保存在-20℃以下，并盡量避免反復(fù)凍融，凍融次數(shù)不宜超過5次。盡管膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯對(duì)本試劑盒檢測(cè)結(jié)果無顯著干擾，仍應(yīng)避免使用黃疸、溶血或高血脂樣品。明顯被污染的樣品不能用于檢測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.  試驗(yàn)過程注意事項(xiàng)
1.1  試劑盒各組份從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應(yīng)在室溫（20℃～25℃）平衡至無潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應(yīng)放入密封袋內(nèi)保存。
1.2  在儲(chǔ)存及溫育過程中，應(yīng)避免強(qiáng)光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3  為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應(yīng)使用一次性吸嘴，不要重復(fù)使用。
1.4  在取用對(duì)照品和酶標(biāo)記物之前應(yīng)輕輕搖動(dòng)使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過的樣品。
1.5  嚴(yán)格遵守規(guī)定的溫育時(shí)間和溫度。如果第一個(gè)孔與最后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔太長(zhǎng)，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。
1.6  洗滌結(jié)束時(shí)，應(yīng)將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，以確保所有孔內(nèi)均無洗滌緩沖液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)注意正確操作。
2.  試驗(yàn)準(zhǔn)備
2.1  試劑盒反應(yīng)試劑準(zhǔn)備
2.1.1  微孔條
將檢測(cè)所需數(shù)量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2  洗滌液
在干凈的量筒內(nèi)稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3  其它液體組份
直接使用，使用前應(yīng)輕輕搖動(dòng)使其充分混勻。
2.2  樣品準(zhǔn)備
樣品1:100稀釋：取10L待檢樣品，加入至含有1mL樣品稀釋液（IgG）的小試管內(nèi)，充分混勻。
3．  檢測(cè)過程
3.1  每次實(shí)驗(yàn)每板須設(shè)空白孔（若以雙波長(zhǎng)檢測(cè)不設(shè)空白孔）、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各1孔，臨界對(duì)照3孔。空白孔不加樣品和酶標(biāo)記物，只加洗液、顯色液A、顯色液B和終止液；陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、臨界對(duì)照直接使用，100L/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100L。置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.2  甩凈孔中液體，將洗液注滿每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復(fù)3次。除空白孔外每孔加酶標(biāo)記物50μL，置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.3  甩凈孔中液體，同上洗板3次，拍干后各孔加顯色液A、顯色液B各50μL，置37℃±1℃避光15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4  單波長(zhǎng)檢測(cè)：以空白孔調(diào)零，用酶標(biāo)儀讀取450nm處的A值；
雙波長(zhǎng)檢測(cè)：用酶標(biāo)儀讀取450nm和630nm處的A值，以A450nm－A630nm計(jì)算A值。
4.  參考范圍
陰性對(duì)照A值≤0.15，0.20≤臨界對(duì)照A值平均值≤0.80，臨界對(duì)照A值平均值／陰性對(duì)照A值平均值≥2.0，陽(yáng)性對(duì)照A值＞臨界對(duì)照A值平均值，證明實(shí)驗(yàn)成立，否則試驗(yàn)結(jié)果無效，需重新試驗(yàn)。
5.  結(jié)果判定
計(jì)算S/CO值，S/CO=樣品A值／臨界對(duì)照A值平均值。
反應(yīng)性（R）：S/CO≥1.1
可疑（S）：0.9＜S/CO＜1.1
陰性（N）：S/CO≤0.9
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1.  結(jié)果為反應(yīng)性提示包蟲感染，對(duì)反應(yīng)性或可疑結(jié)果建議進(jìn)行影像學(xué)檢查。 
2.  檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，臨床醫(yī)生應(yīng)結(jié)合病史、癥狀及影像學(xué)檢測(cè)結(jié)果做出診斷。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1.  樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。
2.  研究顯示本品與弓形蟲、肺吸蟲、旋毛蟲、血吸蟲IgG抗體陽(yáng)性血清無交叉反應(yīng)；與部分囊蟲IgG抗體陽(yáng)性血清有交叉反應(yīng)，應(yīng)結(jié)合病史、癥狀、影像學(xué)檢測(cè)結(jié)果及流行病學(xué)調(diào)查加以甄別；與其它病原體的交叉反應(yīng)尚無實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1.  靈敏度、特異性
本品檢測(cè)1080例包蟲病流行區(qū)和非流行區(qū)人群樣本，與影像學(xué)檢測(cè)比較，其靈敏度為91.0%，特異度為94.7%。
2.  精密性
批內(nèi)變異系數(shù)CV（%）不高于15%（n＝10）。
3.  交叉反應(yīng)
與弓形蟲、肺吸蟲、旋毛蟲、血吸蟲等病原體的IgG抗體陽(yáng)性血清未發(fā)現(xiàn)交叉反應(yīng)；與部分囊蟲IgG抗體陽(yáng)性血清有交叉反應(yīng)。
與甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒HIV（1/2型）陽(yáng)性血清、肝癌患者、肝囊腫患者、細(xì)菌性肝膿腫患者、膽囊積液患者、肺結(jié)核患者血清無交叉反應(yīng)。
4.  內(nèi)源性物質(zhì)干擾試驗(yàn)
樣品中膽紅素0.1~0.4 mg/mL、血紅蛋白5~50 mg/mL、甘油三酯2~8 mg/mL濃度范圍內(nèi)對(duì)本品檢測(cè)結(jié)果無顯著干擾。
5.  對(duì)國(guó)家參考品檢測(cè)能力
本品檢測(cè)國(guó)家參考品（230029-201001），8份陰性參考品檢測(cè)結(jié)果全部為陰性；8份陽(yáng)性參考品檢測(cè)結(jié)果全部為陽(yáng)性；精密性≤15％（n=10）；最低檢出量不高于1：16，均符合國(guó)家參考品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。
【注意事項(xiàng)】
1.  本品僅用于體外診斷，一次性使用。
2.  用于制備本品陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、臨界對(duì)照的血清已經(jīng)HBsAg、HCV抗體、梅毒螺旋體抗體和HIV抗體檢測(cè)為陰性，試劑盒內(nèi)其它各種組份均無生物傳染性。由于不能保證檢測(cè)各組份所有的傳染性因素，因此本品應(yīng)作為具有潛在的傳染性材料對(duì)待，所有接觸試劑盒的人員應(yīng)按實(shí)驗(yàn)室規(guī)范要求進(jìn)行操作。
3.  任何臨床樣品都應(yīng)作為具有傳染性樣品對(duì)待。
4.  待檢樣品及其他潛在感染材料試驗(yàn)后應(yīng)予以消毒。
5.  注意避免皮膚或黏膜直接接觸試劑或樣品。顯色液中含TMB，終止液含硫酸。含TMB的試劑在試驗(yàn)中會(huì)誘發(fā)其它反應(yīng)；含硫酸的試劑有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應(yīng)立即用水徹底清洗。
【標(biāo)識(shí)的解釋】
包裝標(biāo)簽
的標(biāo)識(shí)    
標(biāo)識(shí)的含義 溫度限制 體外診斷醫(yī)療器械 參考使用說明 不得二次使用
【參考文獻(xiàn)】
 [1] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS257-2006）“包蟲病診斷標(biāo)準(zhǔn)”。
【基本信息】
注冊(cè)人/生產(chǎn)企業(yè)名稱：珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)海泰生物制藥有限公司
住所：珠海市唐家灣鎮(zhèn)港灣大道創(chuàng)新四路18號(hào)     
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生產(chǎn)地址：珠海市唐家灣鎮(zhèn)港灣大道創(chuàng)新四路18號(hào)     
生產(chǎn)許可證編號(hào)： 
【醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào)/產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)】
【說明書核準(zhǔn)及修改日期】